商 品名:L-Glutamic Acid
分子式:C5H9NO4
结 构式: 
分子量:147.13
性状:白色结晶性粉末。能溶于水,微溶于醇、醚、丙酮和乙酸。
原料规格:
|
项目 |
技术要求 |
检测提示 |
|
外观 |
白色结晶粉末 |
|
|
比旋光度?zα?{20D |
+31°~+32° |
比旋光度测定法 |
|
水分,% ≤ |
0.5 |
水分和挥发物的检测方法(恒重法) |
|
铅,% ≤ |
0.001 0 |
GB/T 7917.3―1987 |
测试方法:
含量测定
(1)原理:L-谷氨酸在大肠杆菌的谷氨酸胱羧酶作用下脱羧释出二氧化碳。通过测量反应系统中气体压力的改变,计算求出生成的二氧化碳体积,然后换算成谷氨酸含量。此测定利用华勃氏呼吸仪进行。
(2)试剂:
a) 大肠杆菌丙酮粉的制备:大肠杆菌37℃液体培养18h(培养基成分:豆饼水解液3%,蛋白胨1%,酵母膏1%,牛肉膏1%,玉米浆0.5%,磷酸氢二钾0.25%,pH7.0),离心(3 500r/min)20min,收集菌体。菌体用冷蒸馏水或生理盐水洗涤,离心后,将菌体用冷丙酮(0℃以下)搅匀,抽滤,所得粉白色的大肠杆菌丙酮粉,具有专一性强的谷氨酸脱羧酶的活性。置冰箱贮存,保持数月酶活性不变。
b) 0.5mol/L pH4.8乙酸盐缓冲液:称取68.04g乙酸钠,用蒸馏水溶解后,加乙酸调至pH4.8,最后定容至1 000mL。
c) 2%大肠杆菌丙酮粉悬浮液(含谷氨酸脱羧酶):称取丙酮粉2g,溶于100mL pH4.8的0.5mol/L乙酸盐缓冲液中。
(3)测定:
a) 取样品稀释液1mL(谷氨酸含量为0.5~1.0mg),于瓶主室中,再加pH4.8乙酸盐缓冲液0.2mL、蒸馏水2mL;在反应瓶侧室内加入0.3mL大肠杆菌丙酮粉悬液。
b) 装瓶密封,固定在振荡板上放入37℃恒温水浴。旋调减压液达260mm左右,振荡,与外界平衡5min,记下开口端减压液高度,此为初读值。
c) 记下初读值后,迅速将侧室中酶液倒入反应液中,振荡10~15min(使二氧化碳完全释出)。旋调减压液闭口端至150mm,记下开口端减压液高度,此读数减去初读数再加上或减去空白瓶差额即为压差ΔH。
根据式(4-1-3)计算谷氨酸含量:
谷氨酸含量(mg)=K×ΔH×147.130÷22 400 000 …………(4-1-3)
式中:ΔH――减压管上读出的压差毫升数,mL;
147.130――谷氨酸相对分子质量;
22 400 000――1 mol L-谷氨酸脱羧标准状态下放出二氧化碳的微升数,mL;
K――反应瓶常数。
安全性提示:使用时基本无毒,无刺激性,无过敏反应。
用途:生化试剂。用作化妆品的营养添加剂。
贮藏条件:置于阴凉、干燥、通风处,密封保存。最好低温贮存。 |