理化性质: 黄褐色粉末或棕黄色液体,能从淀粉链的非还原性末端切开α-1,4和α-1,6键,从而使淀粉水解成葡萄糖。作用温度55~60℃,最适温度58~60℃,作用pH值范围4.0~5.0,最适pH值为4.5。
来源与制法: 由黑曲霉素(As3.4309)经深层培养、提取、精制而得。
毒理学依据:
① LD50:小鼠经口11.7g/?K。
② 致突变试验:本品在体内无明显蓄积作用,无致突变作用。
③ ADI:无限制性规定(FAO/WHO,1994)。
质量要求:质量标准(GB 8276―1987)
酶活力①/(U/g) 30000~20000
/(U/ mL)(20000~80000)
水分/% ≤ 8.0
细度(通过40目铜网筛)/% ≥ 80
酶活力保存率(室温下半年)/% ≥ 80
重金属(以Pb计)/% ≤ 0.004
铅/% ≤ 0.001
砷(以As计)/% ≤ 0.0003
黄曲霉毒素 B1/% ≤ 0.0000005
大肠杆菌群/(个/100g)≤ 30
沙门菌 不得检出
① 酶活力用ADU/g表示,即1个α-乙酰乳酸脱羟酶单位(ADU)是在标准条件下每分钟使α-乙酰乳酸脱羟产生1mmol乙偶姻的酶量。
用途与注意事项: 酶制剂。本品耐酸性较好,在25℃、pH值为3时活力稳定;55~60℃时活力最高;60℃、30min以上时活力降低显著;80℃以上活力全部消失。我国《食品添加剂使用卫生标准》(GB 2760―1996)规定:来自黑曲霉的糖化酶可在淀粉生产、酿造、果汁加工中按生产需要适量使用。用于白酒、酒精生产,先将原料粉碎,打浆,用α-淀粉酶液化、蒸煮,将醪液冷却至60℃,加入用水调匀的糖化酶,用量80~100U/g原料,于58~60℃糖化即可;味精生产中,双酶法制糖也常使用本品。
活力测定:
① 活力单位:1g固体酶粉(或1mL液体酶),温度在60℃、pH值=4.6的条件下,1h分解可溶性淀粉产生1mg葡萄糖,为1个活力单位,以U/g(或U/mL)表示。
② 准确称取酶粉1g,(或吸取液体酶1.00mL),用pH值=4.6的醋酸-醋酸钠缓冲液(醋酸钠7g/L)溶解,定容稀释后过滤。取甲乙两支50mL试管,分别加入25.0mL经糊化后的可溶性淀粉溶液(20g/L)与5mL醋酸-醋酸钠缓冲液,摇匀后,于40℃恒温水浴中预热5~10min。在甲试管中加入2.00mL稀释酶液,立刻计时,准确反应1h后。立即各加0.2mL氢氧化钠溶液(200g/L),冷却摇匀,并在乙试管补加2.00mL稀释酶液后各加于10.0mL碘液(12g/L,可加少量碘化钾助溶),摇匀于暗处放置15min,加2mL硫酸溶液(1+9),用0.05mol/L硫代硫酸钠标准溶液滴定至浅黄色,加1mL淀粉指示液(1g/L),继续滴定至紫色消失。
③ 计算公式
式中 X――酶活力,U;
A――滴定甲试管溶液消耗硫代硫酸钠标准溶液体积,mL;
B――滴定乙试管溶液消耗硫代硫酸钠标准溶液体积,mL;
c――硫代硫酸钠标准溶液浓度,mol/L;
90――每毫升1mol/L硫代硫酸钠标准溶液相对葡萄糖的量,mg;
2――酶液用量,mL;
n――酶稀释倍数。 |