理化性质: 为乳白色粉末。Pentopan mono BG为淡棕色、自由流动的聚集粉末,其颗粒大小平均约为150μm,1%颗粒小于50μm。适宜反应条件:pH值为4.0~6.0,温度在75℃以下。焙烤时失去活性。
来源与制法: 由米曲霉经发酵、提纯制成。该菌种携带来源于疏毛嗜热放线菌的编码木聚糖酶的基因。
毒理学依据:
① LD50:大于10g/?K(小鼠,经口)。
② 致突变试验:Ames试验、精子畸变试验、微核试验,均为阴性(卫生部食品卫生监督检验所报告)。
③ 13周大白鼠饲养试验:剂量10.0mL(kg•d)[142000U/(?K•d)]没有明显不良反应,此剂量可作为无作用剂量水平[142000U/?K或1.33gTOS/(kg•d)]。
质量要求:质量标准
酶活性 根据说明书
重金属(以Pb计)/% ≤ 0.004
铅/% ≤ 0.001
砷(以As计)/% ≤ 0.0003
细菌总数/(个/g) ≥ 5×104
真菌数/(个/g)≤ 100
大肠杆菌数/(个/g)≤ 30
肠道病原杆菌/(个/25g) 阴性
沙门菌/(个/25g) 阴性
抗生菌活性 阴性
繁殖性微生物 阴性
真菌毒性 阴性
用途与注意事项: 酶制剂。本品是一种内木聚糖酶,能够水解阿拉伯木糖中的木糖苷键,使阿拉伯木糖解聚成小分子的寡糖。本品无α-淀粉酶活性,使用时可将α-淀粉酶与木聚糖酶混合使用。我国《食品添加剂使用卫生标准》(GB 2760―1996)规定:木聚糖酶(米曲霉)用于焙烤、淀粉工业方面按生产需要适量使用。其他使用参考:具体应用于焙烤工业时,每100?K面粉用PentopanTMMono2~16g或400Fxu,反应条件为pH值为4.0~6.0,温度75℃以下,用于面包焙烤,在焙烤过程中可提高蛋白质的延展性,使焙烤出的面包体积增大,结构更好,更松软可口。还可增加生面团的弹性,使之容易混合和操作。
活力测定:
① 活力单位:在40℃、pH值为5.5的条件下,每分钟从浓度为10mg/mL的木聚糖溶液中降解释放1μmol还原糖所需要的酶量为一个酶活力单位U。
② 分别吸取木糖溶液1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL、5.00mL、6.00mL和7.00mL,分别用水定容至100mL,配制成浓度为0.10~0.70mg/mL木糖标准溶液。分别吸取木糖稀释标准溶液各2.00mL,分别加入到比色管中,再分别加入2mL水、5mL3,5-二硝基水杨酸溶液(3g/L)、10mL乙酸缓冲溶液(0.1mol/L,pH值为5.5),摇匀。沸水浴加热5min。然后用自来水冷却到室温,再用水定容至25mL。以试剂溶液为空白,在540nm处测定吸光度A值。绘制木糖质量对吸光度标准曲线。
在比色管中加入2.00mL稀释酶液(经过40℃预热),再加入5mL3,5-二硝基水杨酸溶液(3g/L),摇匀。然后加入2.0mL木聚糖溶液、10mL乙酸缓冲溶液(0.1mol/L,pH值为5.5),沸水浴加热5min。用自来水冷却到室温,加水定容至25mL,摇匀。以试剂溶液为空白,在540nm处测定吸光度A0。另取比色管吸取2.00mL稀释酶液、10mL乙酸缓冲溶液(0.1mol/L, pH值为5.5)(经过40℃预热),加入到比色管中,再加入2.0mL木聚糖(经过40℃预热),摇匀,40℃下准确保温30min。加入5.0mL3,5-二硝基水杨酸溶液(3g/L),摇匀。以防止酶解反应。沸水浴加热5min,用自来水冷却到室温,加水定容至25mL,摇匀。以试剂溶液为空白,在540nm处测定吸光度A1。根据A1-A0的差值在标准曲线找到对应的木糖质量并按下式计算木聚糖酶活力。
③ 计算公式
式中 X――酶活力,U/g;
C――对应的木糖质量,mg;
n――稀释倍数;
m――参与反应的酶量,g;
30――换算为1min;
1000――换算木糖质量为,μg;
150.15――1mol/L木糖的质量,g。 |