理化性质: 近白色或浅棕黄色颗粒,柱状或条状。最适作用温度60℃,适用温度30~75℃。最适作用pH值范围7.0~7.5,适用pH值范围6.0~8.0。最高活性在反应系统中需要有Mg2+及Co2+。其最适浓分别为10-2 mol/L和10-3 mol/L。可溶于水,但不溶于乙醇、氯仿和乙醚。
来源与制法: 由用米苏里游动放线菌AC-81-2、嗜热链霉菌M1033等微生物发酵法生成的酶经固定化制得。
毒理学依据:
①LD50:大鼠经口15 g/kg(bw)。
②ADI:无限制性规定(FAO/WHO,1994)。
③GRAS:FDA-21CFR 184.1372 。
质量要求:质量标准(GB8274―1987)
酶活力①/(U/g)≥ 2000
生产能力/(t/kg)≤ 1.5
酶活力保存率≥(0~5℃,3个月)/% 85
强度 合格
重金属/% ≤ 0.004
铅/% ≤ 0.001
砷(以As计)/% ≤ 0.0003
黄曲霉毒素 B1/% ≤ 0.0000005
大肠杆菌群/(个/g)≤ 30
沙门菌 不得检出
① 在规定条件下,每小时生成1mg果糖规定为1个单位,用GIU表示。将上述数量除以1.08即为国际单位,用IRGIU表示。
用途与注意事项:酶制剂。果葡糖浆生产一般应在60℃下进行,如温度过高,除酶易受热而失活,糖粉也可受热分解,产生有色物质。我国《食品添加剂使用卫生标准》(GB2760―1996)规定:用于制造果葡糖浆,可按生产需要适量使用。丹麦Novo公司推荐的连续生产果葡糖浆的工艺条件为(使用该公司产品Q型Sweetzyme)底物浓度为35%~45%DS;葡萄糖含量93%~97%;进口处pH值为8.2(25℃);温度61℃;MgSO4?7H2O添加量,每升糖浆0.1g。Co2+、Mg2+ 对本品有激活作用;山梨醇和甘露醇对本品有强抑制作用。
活力测定:
①活力单位:1g固体酶粉(或1 mL液体酶),1h内转化葡萄糖产生1mg果糖的酶量,为1个活力单位,以U/g(或U/ mL)表示(可用GIU或IRGIU表示)。
②准确称取一定量的酶粉,用0.02mol/L的磷酸缓冲液(pH值=7.5)1mL浸泡16h后,分别加入1.5mL磷酸缓冲液、0.5mL磷酸镁溶液(0.5mol/L)、1.5mL葡萄糖溶解(70 g/100 mL),再加水至总体积为5 mL,于70℃恒温水浴中反应1h,加入于5 mL高氯酸溶液(0.5 mol/L)终止反应。分取1.0 mL反应液,依次加入0.2mL半胱氨酸溶液(15g/L)、6 mL硫酸溶液(5+2),摇匀后加入0.2 mL咔唑酒精溶液(1.2 g/L),摇匀于60℃水浴保持10 min,于560nm波长处,测定其吸光度。用不同浓度的果糖标准溶液,以同样显色、测定方法测定吸光度,并做果糖质量对吸光度的标准曲线。根据反应液的吸光度查出标准曲线上对应的果糖质量计算。
③计算公式

式中 X――酶活力,U/g;
C――标准曲线对应反应液的果糖质量,g;
m――酶量,g;
n――测定果糖占总反应液的比例。 |