理化性质: 纯木瓜蛋白酶系由212个氨基酸组成的单链蛋白质,相对分子质量为23406。制品可含有木瓜蛋白酶、木瓜凝乳蛋白酶和溶菌酶等不同的酶。产品为乳白色至微黄色粉末,具有木瓜特有的气味,稍具有吸湿性。水解蛋白质能力强,但几乎不能分解蛋白胨。木瓜蛋白酶为酸性蛋白酶,适宜pH值为5.0,适宜反应温度65℃。易溶于水、甘油,不溶于一般的有机溶剂,等电点为8.75。
来源与制法: 用天然的木瓜乳汁直接干燥、精制而成。
毒理学依据:
①LD50:小鼠口服584mg/kg(bw)(雄性),小鼠口服926 mg/kg(bw)(雌性)。
②ADI:无须规定(FAO/WHO,1994)。
③GRAS:FDA-21CFR 184.1585 。
质量要求:质量标准(DX440000×413―1987)
酶活力①/(万U/g) ≤ 60
干燥失重/% ≤ 7
灰分/% ≤ 12
铁/% ≤ 0.0020
铅/% ≤ 0.0002
砷(以As计)/% ≤ 0.0002
大肠杆菌群/(个/100g) ≤ 30
致病菌 不得检出
①在规定条件下,1min内酶水解酪蛋白释放出相当于19µg/ mL酪氨酸(在紫外分光光度计275nm波长处的吸收度)为1U。
用途与注意事项:酶制剂。我国《食品添加剂使用卫生标准》(GB2760―1996)规定:用于水解动、植物蛋白,饼干,肉、禽制品,可按生产需要适量使用。其他使用参考:用于啤酒澄清(水解啤酒中的蛋白质,避免冷藏时产生浑浊),使用量0.5~5 mg/kg;肉类嫩化(水解肌肉蛋白中的胶原蛋白),使用量为宰前注射0.5~ 5mg/kg;用于饼干、糕点松化,可代替亚硫酸盐,既有降筋效果,又提高了安全性,可使产品疏松,降低碎饼率。在动、植物蛋白食品加工方面,如用于蛋白质水解产物和高蛋白饮料,可提高产品质量和营养价值,提高产品消化吸收率;在酱油酿造中加入本品和其他酶,可提高产率和氨基酸含量;在制造啤酒麦芽汁时,加入本品和其他酶,可减少麦芽的用量,降低成本,使用量为0.1%。本品可作为凝乳酶的代用品和干酪的凝乳剂。
本品耐热性强,可在50~60℃时使用,70~80℃时活力急剧下降,82~83℃失活。在pH值低于4且温度上升时,也会迅速不可逆地失活。Fe2+、Cu2+、氧化剂对其活性影响很大。制品中水分大于7%时,活力降低很快。
活力测定:
①活力单位:在40℃条件下,使蛋白液在280nm波长处的吸光度,在20min内每改变0.001所需的酶量,为1个蛋白酶活力单位。
②用移液管吸取10 mL底物溶液(3 g/100 mL的pH值=4.1的血红蛋白盐酸溶液)加入试管中,在40℃水浴保温,加入2.0mL酶液,振荡,保温20min。立即向试管中加入20 mL三氯醋酸溶液(10 g/100 mL),以终止反应。静置30 min,于280nm波长处测定其吸光度AX。空白试验是吸取10 mL底物溶液与同量的三氯醋酸溶液混合后再加2.0 mL酶液,同样进行比色AB。用不同浓度的稀释酶溶液,以同样方法进行反应并测定各个吸光度,并做酶浓度对吸光度的标准曲线。根据标准曲线上相邻的吸光度差值计算其活力。
③计算公式
式中 X――酶活力,U/g;
AB――空白吸光度值;
AX――反应液吸光度值;
A1――标准曲线上吸光度值;
A2――标准曲线上吸光度值 ;
m1――与A1对应的酶量,g;
m2――与A2对应的酶量,g;
n――稀释倍数。 |